Bảng sinh hóa api 20e các loài thuộc họ enterobacterỉaceae

Lượt xem: 553

Hệ thống định danh sinh hóa API 20E được thể hiện là một bảng sinh hóa để xác định và phân biệt các chủng của họ Enterobacteriaceae. Strip thử nghiệm sinh hóa API 20E. Nhiều ưu điểm để được người sử dụng tin chọn. Trong bộ API 20E để xác định các chủng của họ Enterobacteriaceae, dải nhựa gồm 20 buồng thử nghiệm nhỏ chứa môi trường khô có các thành phần hóa học xác định cho mỗi thử nghiệm.

1. ONPG : kiểm tra enzym β-galactosidase bằng thủy phân chất nền o-nitrophenyl-bD-galactopyranoside
2. ADH: decarboxyl hóa axit amin arginine bởi arginine dihydrolase
3. LDC: decarboxyl hóa amino acid lysine bởi lysine decarboxylase
4. ODC: decarboxylations axit amin ornithine bởi ornithine decarboxylase
5. CIT: sử dụng citrate là nguồn carbon duy nhất
6. H2S: sản xuất hydrogen sulfide
7. URE: kiểm tra enzym urease
8. TDA (Tryptophan deaminase): phát hiện enzyme tryptophan deaminase: Thuốc thử để đưa vào- Ferric Chloride.
9. IND: Indole Test – sinh indole từ tryptophan bởi enzyme tryptophanase. Thuốc thử – Indole được phát hiện bằng cách thêm thuốc thử của Kovac.
10. VP: xét nghiệm Voges-Proskauer để phát hiện acetoin (acetyl methylcarbinol) được sinh ra bằng cách lên men glucose bởi vi khuẩn sử dụng dẫn xuất butylen glycol
11. GEL: thử nghiệm cho việc sinh enzyme gelatinase hóa lỏng gelatin
12. GLU: lên men glucose (đường hexose)
13. MAN: lên men mannose (đường hexose)
14. INO: lên men inositol (cyclic polyalcohol)
15. SOR: lên men sorbitol (đường rượu)
16. RHA: lên men rhamnose (đường methyl pentose)
17. SAC: lên men sucrose (disaccharide)
18. MEL: lên men melibiose (disaccharide)
19. AMY: lên men amygdalin (glycoside)
20. ARA: lên men arabinose (đường pentose)

Thiết lập dải định danh sinh hóa API 20E

1. Chọn một khuẩn lạc riêng rẻ (từ chủng thuần) và thực hiện cấy nó vào trong nước cất vô trùng.
2. Lấy dải kiểm tra sinh hóa API20E chứa các thuốc thử sinh hóa/ môi trường khô trong 20 ngăn riêng biệt. Dải kiểm tra sinh hóa API20E có sẵn trên thị trường. (Vi khuẩn sẽ phản ứng với chúng và sẽ cho các màu khác nhau giúp xác định vi khuẩn ở mức độ loài).
3. Dùng pipet pasteur để hút dung dịch huyền phù vi khuẩn vào các ngăn (lên đến vành) các ngăn này với huyền phù vi khuẩn.
4. Thêm dầu vô trùng vào ngăn ADH, LDC, ODC, H2S và URE.
5. Cho vài giọt nước vào khay của dải kiểm tra API và đóng khay lại.
6. Đánh dấu khay bằng số nhận dạng (ID bệnh nhân hoặc ID sinh vật), ngày và tên viết tắt của bạn.
7. Ủ khay ở 37 o C trong 18 đến 24 giờ.

Kết quả và diễn giải

1. Đối với một số ngăn, có thể đọc sự thay đổi về màu sắc ngay sau 24 giờ ủ, đối với một số ngăn khác cần phải thêm thuốc thử trước khi đọc.
2. Thêm các thuốc thử sau vào các ngăn cụ thể :

TDA: Nhỏ một giọt Ferric Chloride IND: Nhỏ một giọt thuốc thử Kovacs VP: Nhỏ một giọt 40% KOH (thuốc thử VP 1) và một giọt thuốc thử VP 2 (α-Naphthol) (bạn phải đợi 10 phút trước khi kết luận nó âm tính).Xem thêm bài viết Môi trường Nuôi Cấy Vi Khuẩn Sinh Màu (Chromogenic Culture Media)

1. Nhận thang đọc API (biểu đồ màu)
2. Đánh dấu từng thử nghiệm là dương hoặc âm trên nắp khay
3. Các giếng được đánh dấu theo bộ ba bởi các hình tam giác màu đen, điểm số được phân bổ theo HDSD.

4. Thêm điểm số cho các giếng dương tính trong mỗi bộ ba. Các xét nghiệm bổ sung, ví dụ: oxidase cũng có thể được bao gồm trong hồ sơ. Điểm cao nhất có thể cho một bộ ba là 7 (tổng của 1, 2 và 4) và số thấp nhất là 0

• Do đó, dãy số cho sự kết hợp của các phản ứng này là 7031645 (mã 7 chữ số)
• Xác định sinh vật bằng cách sử dụng danh mục API hoặc apiweb
• Xác định sinh vật bằng cách sử dụng API web :
• Khởi động trình duyệt web Internet Explorer hoặc Firefox
• Truy cập: //apiweb.biomerieux.com
• Đăng nhập: tên đăng nhập của bạn
• Mật khẩu: mật khẩu của bạn
• Chọn kiểm tra chính xác (ví dụ: API 20E).
• Nhập dãy số để định danh.

Ghi lại kết quả định danh cùng với các chú thích (% ID và giá trị T) trên bảng kết quả. Để biết thêm nhiều thông tin hơn về Hệ thống định danh sinh hóa API 20E, quý anh chị và các bạn vui lòng gửi về địa chỉ mail: info@visitech.vn hoặc liên hệ trực tiếp qua hotline của Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh.

Tôi là Nguyễn Văn Sinh, người chịu trách nhiệm về nội dung cho website visitech.vn. Thông qua web này, tôi muốn chia sẽ kinh nghiệm hơn 10 năm qua của tôi cho cộng đồng yêu thích lĩnh vực kiểm nghiệm, xét nghiệm, phân tích chỉ tiêu hóa lý, vi sinh gây bệnh trong thực phẩm, thủy sản, cây trồng, thú y. Đặc biệt là tôi có niềm đam mê về nuôi cấy mô tế bào thực vật, một trong những lĩnh vực mũi nhọn giúp ích cho nền nông nghiệp công nghệ cao của nước ta giai đoạn tới. Rất vui được kết bạn và giao lưu học hỏi với tất cả mọi người!